Virulence genes in Escherichia coli isolates from commercialized saltwater mussels Mytella guyanensis (Lamarck, 1819) / Presença de genes de virulência em isolados de Escherichia coli provenientes de sururu Mytella guyanensis (Lamarck, 1819) comercializado

Abstract The isolation of Escherichia coli from food is a major concern. Pathogenic strains of these bacteria cause diseases which range from diarrhea to hemolytic-uremic syndrome. Therefore the virulence genes in E. coli isolates from the mussel ( Mytella guyanensis) commercialized in Cachoeira, Bahia, Brazil were investigated. Samples were purchased from four vendors: two from supermarkets and two from fair outlets. They were conditioned into isothermal boxes with reusable ice and transported to the laboratory for analysis. E. coli strains were isolated in eosin methylene blue agar, preserved in brain-heart infusion medium with 15% glycerol and stored at -20 °C, after microbiological analysis. Virulence genes in the isolated strains were identified by specific primers, with Polymerase Chain Reaction. Twenty-four isolates were obtained, with a prevalence of elt gene, typical from enterotoxigenic infection, in 75% of the isolates. The stx and bfpA genes, prevalent in enterohemorragic and enteropathogenic E. coli, respectively, were not detected. The occurrence of elt virulence-related gene in the E. coli isolates of Mytella guyanensis reveals urgent improvement in food processing, including good handling practices, adequate storage and cooking before consumption, to ensure consumer's health.

Resumo O isolamento de Escherichia coli a partir de alimentos é uma grande preocupação, pois cepas patogênicas desta bactéria podem causar desde diarreia até síndrome hemolítico-urêmica. Diante do exposto, o objetivo do trabalho foi pesquisar genes de virulência em isolados de Escherichia coli provenientes do sururu Mytella guyanensis comercializado na cidade de Cachoeira, Bahia, Brasil. As amostras foram adquiridas de quatro comerciantes, sendo duas de mercados e duas em pontos de venda na feira livre da cidade de Cachoeira, acondicionadas em caixas isotérmicas com gelo reutilizável e transportadas até o laboratório para a análise. Após a análise microbiológica, as cepas de Escherichia coli foram isoladas em ágar Eosina Azul de Metileno e preservadas em caldo Brian Heart Infusion e glicerol a 15% e mantidas a - 20° C. A identificação dos genes de virulência nas cepas isoladas foi realizada utilizando primers específicos, por meio da Reação em Cadeia da Polimerase. Foram obtidos 24 isolados de Escherichia coli, destes a prevalência do gene elt , característico de Escherichia coli enterotoxigênica, foi de 75% dos isolados. Não houve a detecção dos genes stx e bfpA nos isolados, os quais são prevalentes nas cepas de Escherichia coli enterohemorrágica e Escherichia coli enteropatogênica, respectivamente. A presença do gene elt relacionado à virulência de Escherichia coli nos isolados de Mytella guyanensis revela a necessidade da melhoria no processamento, incluindo boas práticas de manipulação, armazenamento adequado e cocção previa ao consumo, visando a garantia da saúde do consumidor.

Coliformes termotolerantes em água de cultivo de pesqueiros / Thermotolerant coliformes in fishing cultivation water

Objetivou-se investigar a qualidade da água através das variáveis microbiológicas, sob a influência sazonal, nos períodos seco e chuvoso, de três pesque-pagues de São Luís de Montes Belos, Goiás. Em ambos os períodos, seco e chuvoso, os parâmetros microbiológicos, mantiveram-se os mesmos: < 1000 NMP/mL de Coliformes termotolerantes e Escherichia coli. A análise dos resultados evidenciou 10% dos valores em desacordo aos padrões recomendados pela organização mundial da saúde (OMS). Indicando um processo de degradação da qualidade da água. Recomenda-se o controle da qualidade da água através do manejo adequado e o tratamento do efluente dos pesqueiros visando evitar a degradação ambiental das bacias relacionadas.

Virulence genes in Escherichia coli isolates from commercialized saltwater mussels Mytella guyanensis (Lamarck, 1819)

Abstract The isolation of Escherichia coli from food is a major concern. Pathogenic strains of these bacteria cause diseases which range from diarrhea to hemolytic-uremic syndrome. Therefore the virulence genes in E. coli isolates from the mussel ( Mytella guyanensis) commercialized in Cachoeira, Bahia, Brazil were investigated. Samples were purchased from four vendors: two from supermarkets and two from fair outlets. They were conditioned into isothermal boxes with reusable ice and transported to the laboratory for analysis. E. coli strains were isolated in eosin methylene blue agar, preserved in brain-heart infusion medium with 15% glycerol and stored at -20 °C, after microbiological analysis. Virulence genes in the isolated strains were identified by specific primers, with Polymerase Chain Reaction. Twenty-four isolates were obtained, with a prevalence of elt gene, typical from enterotoxigenic infection, in 75% of the isolates. The stx and bfpA genes, prevalent in enterohemorragic and enteropathogenic E. coli, respectively, were not detected. The occurrence of elt virulence-related gene in the E. coli isolates of Mytella guyanensis reveals urgent improvement in food processing, including good handling practices, adequate storage and cooking before consumption, to ensure consumers health.

Resumo O isolamento de Escherichia coli a partir de alimentos é uma grande preocupação, pois cepas patogênicas desta bactéria podem causar desde diarreia até síndrome hemolítico-urêmica. Diante do exposto, o objetivo do trabalho foi pesquisar genes de virulência em isolados de Escherichia coli provenientes do sururu Mytella guyanensis comercializado na cidade de Cachoeira, Bahia, Brasil. As amostras foram adquiridas de quatro comerciantes, sendo duas de mercados e duas em pontos de venda na feira livre da cidade de Cachoeira, acondicionadas em caixas isotérmicas com gelo reutilizável e transportadas até o laboratório para a análise. Após a análise microbiológica, as cepas de Escherichia coli foram isoladas em ágar Eosina Azul de Metileno e preservadas em caldo Brian Heart Infusion e glicerol a 15% e mantidas a - 20° C. A identificação dos genes de virulência nas cepas isoladas foi realizada utilizando primers específicos, por meio da Reação em Cadeia da Polimerase. Foram obtidos 24 isolados de Escherichia coli, destes a prevalência do gene elt , característico de Escherichia coli enterotoxigênica, foi de 75% dos isolados. Não houve a detecção dos genes stx e bfpA nos isolados, os quais são prevalentes nas cepas de Escherichia coli enterohemorrágica e Escherichia coli enteropatogênica, respectivamente. A presença do gene elt relacionado à virulência de Escherichia coli nos isolados de Mytella guyanensis revela a necessidade da melhoria no processamento, incluindo boas práticas de manipulação, armazenamento adequado e cocção previa ao consumo, visando a garantia da saúde do consumidor.

Qualidade da água de abastecimento público do município de Jaboticabal, SP / Quality of public-supply water in Jaboticabal city, Brazil

RESUMO A água de abastecimento público pode ser um veículo de doenças e agravos à saúde humana, portanto, é necessário um tratamento eficiente e constantes avaliações da sua qualidade. O presente estudo objetivou avaliar a dinâmica populacional de indicadores microbiológicos e parâmetros físico-químicos da qualidade da água em diferentes pontos de uma estação de tratamento de água do tipo convencional, do sistema de distribuição e dos mananciais de abastecimento do município de Jaboticabal, São Paulo, nas estações chuvosa e de seca. Os resultados demonstraram que, apesar do manancial superficial apresentar qualidade microbiológica inferior (comparado aos demais mananciais estudados), após tratamento convencional foi obtida a potabilidade do mesmo. A estação chuvosa foi crítica para amostras coletadas nas etapas logo após adição de cloro, principalmente no sistema de distribuição do manancial subsuperficial. Dentre os pontos avaliados na rede de distribuição, os reservatórios domiciliares apresentaram o maior número de amostras fora do padrão de potabilidade, principalmente na rede abastecida pelo manancial subsuperficial. São necessárias estratégias para a melhoria do processo de tratamento da água do dreno - voltado para a redução da turbidez - principalmente na estação chuvosa; assim como programas de educação em saúde para a população, a fim de melhorar a qualidade da água no ponto de consumo, a partir da limpeza periódica dos reservatórios domiciliares.

ABSTRACT The public-supply water can be a vehicle of disease and harm to human health, therefore, efficient treatment and constant evaluation of its quality is required. The present study aimed to evaluate the population dynamics of microbiological and physico-chemical indicators of water quality parameters at different points of a water treatment plant of the conventional type, in the distribution system and sources of supply in Jaboticabal city, São Paulo state, Brazil, in the rainy and dry seasons. The results showed that although the present fountain surface presents worse microbiological quality (compared to other sources studied) after the conventional treatment, it became potable. The rainy season was critical for samples collected in steps after adding chlorine, especially in the distribution of sub-surface source system. Among the evaluated points in the distribution network, domestic containers had the highest number of samples outside the potability standards, mainly those fueled by the sub-surface source network. Strategies to improve the treatment process of the drain water (turbidity reduction) are needed, especially during the rainy season; as well as health education programs in order to improve water quality at the point of consumption by periodic cleaning of domestic containers.

Global assessment of exposure to faecal contamination through drinking water based on a systematic review.

OBJECTIVES: To estimate exposure to faecal contamination through drinking water as indicated by levels of Escherichia coli (E. coli) or thermotolerant coliform (TTC) in water sources. METHODS: We estimated coverage of different types of drinking water source based on household surveys and censuses using multilevel modelling. Coverage data were combined with water quality studies that assessed E. coli or TTC including those identified by a systematic review (n = 345). Predictive models for the presence and level of contamination of drinking water sources were developed using random effects logistic regression and selected covariates. We assessed sensitivity of estimated exposure to study quality, indicator bacteria and separately considered nationally randomised surveys. RESULTS: We estimate that 1.8 billion people globally use a source of drinking water which suffers from faecal contamination, of these 1.1 billion drink water that is of at least 'moderate' risk (>10 E. coli or TTC per 100 ml). Data from nationally randomised studies suggest that 10% of improved sources may be 'high' risk, containing at least 100 E. coli or TTC per 100 ml. Drinking water is found to be more often contaminated in rural areas (41%, CI: 31%-51%) than in urban areas (12%, CI: 8-18%), and contamination is most prevalent in Africa (53%, CI: 42%-63%) and South-East Asia (35%, CI: 24%-45%). Estimates were not sensitive to the exclusion of low quality studies or restriction to studies reporting E. coli. CONCLUSIONS: Microbial contamination is widespread and affects all water source types, including piped supplies. Global burden of disease estimates may have substantially understated the disease burden associated with inadequate water services.

Escherichia coli J5: imunização de fêmeas bovinas leiteiras contra mastites causadas por Escherichia coli / Escherichia coli J5: immunization of dairy cows against Escherichia coli mastitis

Neste trabalho, revisamos os principais aspectos ligados à mastite causada por coliformes, mais especificamente a Escherichia coli, com enfoque principal nos fatores de risco associados ao animal, bem como na utilização da vacina Escherichia coli J5 na imunização de fêmeas bovinas leiteiras. Os coliformes estão amplamente distribuídos no ambiente, assumindo especial importância em sistemas de criação em que a busca pela qualidade do leite mantém a contagem de células somáticas (CCS) em níveis inferiores a 150000 células ml-1. Nesse contexto, o período seco representa um momento de extrema importância na definição da ausência ou não de um quadro de mastite, decorrente da ação de patógenos ambientais no pós-parto imediato. A terapia para vacas secas frente a infecções por germes ambientais perde eficácia, sendo necessária a associação a outros métodos, como, por exemplo, a vacinação com Escherichia coli J5. A cepa J5, por possuir um antígeno nuclear relativamente exposto, é capaz de estimular a produção de imunoglobulinas que apresentam reação cruzada com antígenos nucleares de outras bactérias, resultando em uma imunidade contra uma variedade de gêneros e cepas bacterianas. Estudos demonstram que a vacinação com Escherichia coli J5 é capaz de reduzir a ocorrência, intensidade e duração de casos clínicos de mastite por Escherichia coli, sendo também observada uma maior produção de leite nos animais vacinados. Entretanto, ainda é controverso seu papel na redução da CCS.

This paper aims to review the main aspects of coliform mastitis, specifically Escherichia coli, emphasizing the immunization of dairy cows with Escherichia coli J5 vaccine, as well as the animal risk factors. Coliforms are widespread in the environment and are of particular importance in farming systems in which the search for a greater milk quality guarantee low somatic cell counts (<150,000 cells ml-1). The dry period is an extremely important moment that plays crucial role in the occurrence of mastitis caused by environmental pathogens during the immediate postpartum. The dry cow therapy against environmental infections has lost effectiveness leading to the need for the combination with other methods such as immunization with Escherichia coli J5 vaccine. Due to a relatively exposed nuclear antigen, the Escherichia coli strain J5 can stimulate the production of immunoglobulins that cross-react with nuclear antigens from other bacteria. It results in immunity against a variety of bacterial genres and strains. It has been shown that the use of Escherichia coli J5 vaccine can reduce the occurrence, intensity and duration of clinical cases of Escherichia coli mastitis, besides increase the production of dairy cows. However, its role in reducing milk SCC is still controversial.

Utilização da vacina Escherichia coli J5 na imunização de vacas leiteiras contra mastites causadas por E. coli / Use of an Escherichia coli J5 vaccine on immunization of dairy cows against mastitis caused by E. coli

Avaliou-se a utilização da vacina Escherichia coli J5, na imunização de vacas leiteiras, para prevenção e controle da mastite causada por E. coli através da análise da prevalência das infecções intramamárias (IMM) no pós-parto, ocorrência e intensidade dos casos clínicos de mastite nos primeiros 100 dias de lactação, influência na contagem de células somáticas (CCS) e produção de leite. O grupo experimental foi composto de 187 animais, divididos em 2 grupos, vacas vacinadas e não vacinadas. As imunizações ocorreram 60 dias antes do parto, 30 dias antes do parto e na primeira semana pós-parto. No dia da secagem e sete dias após o parto foram coletadas amostras para diagnóstico microbiológico dos patógenos causadores de mastite. A ocorrência de casos clínicos foi verificada pelo teste da caneca durante as ordenhas sendo registrados os dados relacionados à intensidade. Amostras foram coletadas mensalmente, a partir do décimo dia de lactação, para avaliação da CCS. A produção de leite foi registrada mensalmente nos primeiros 100 dias de lactação. Verificou-se no grupo vacinado, redução na prevalência de E. coli no pós-parto, na ocorrência de casos clínicos por E.coli nos primeiros 100 dias de lactação bem como na intensidade destes casos clínicos. Não foram observadas diferenças estatísticas significativas na CCS, entretanto vacas vacinadas apresentaram maior produção de leite, comparadas às vacas não vacinadas. A vacinação com E. coli J5 foi eficaz em reduzir a prevalência de infecções intramamárias (IMM) ao parto, ocorrência e intensidade dos casos clínicos e aumento na produção de leite nos primeiros 100 dias de lactação.

We evaluated the use of Escherichia coli J5 vaccine immunization in dairy cows for the prevention and control of mastitis caused by E. coli. Were analyzed the prevalence of postpartum intramammary infections (IMM), occurrence and severity of clinical cases of mastitis in the first 100 days of lactation, influence on somatic cell count (SCC) and milk production. The experimental group consisted of 187 animals that were divided into two groups, vaccinated and unvaccinated cows. Immunizations occurred 60 days before calving, 30 days before calving and the first week postpartum. On the day of drying and seven days after birth, samples were collected for microbiological diagnosis of mastitis pathogens. The occurrence of clinical cases was verified by testing during the milking and data was recorded related to the intensity and duration. Samples were collected monthly starting at day ten of lactation to evaluate the CCS. Milk production was recorded monthly for the first 100 days of lactation. It was found in the vaccinated group reduction in the prevalence of E. coli in the postpartum period, the occurrence of clinical cases of E. coli in the first 100 days of lactation as well the intensity of these clinical cases. There were no statistically significant differences in CCS, however vaccinated cows had higher milk production, compared to unvaccinated cows. Vaccination with E. coli J5 was effective in reducing the prevalence of intramammary infections (IMM) at calving, occurrence and intensity of clinical cases and an increase in milk production in the first 100 days of lactation.

Calidad bacteriológica del agua del río Cataniapo, municipio Atures, estado Amazonas, Venezuela / Sanitary quality of the hydrographic basin of the Cataniapo river, Atures municipality, Amazonas state, Venezuela

La calidad bacteriológica del agua es importante por cuanto es uno de los parámetros usados para la clasificación de las fuentes de agua. En este trabajo se logró determinar la calidad bacteriológica de muestras de agua del río Cataniapo, en 11 puntos distribuidos a lo largo de su cuenca media, baja, y alta, mediante muestreos mensuales realizados, durante julio a diciembre de 2005. Se determinó el Número Más Probable (NMP) de coliformes totales y coliformes fecales presentes en el agua, mediante la técnica de fermentación en tubos múltiples. Se aislaron e identificaron enterobacterias presentes en las muestras de agua de las diferentes estaciones de la cuenca del río Cataniapo. Las menores densidades de coliformes totales y fecales, se evidenciaron durante el período de lluvia: julio - septiembre y las máximas durante el período de sequía: octubre - diciembre. Los resultados del análisis de varianza doble mostraron que existen diferencias significativas entre meses y estaciones para coliformes totales, y diferencias significativas entre estaciones para coliformes fecales; encontrándose que los puntos 1 y 3 de la cuenca baja, presentaron las densidades más altas para este grupo bacteriano, sobrepasando el límite permitido para aguas clasificadas para contacto humano, parcial ó total. La especie Escherichia coli fue identificada con mayor frecuencia en todas las estaciones.

The bacteriologiocal quality of water is an important parameter used for the classification of water supplies. We analyzed the bacteriological quality of the water from the Cataniapo river at 11 stations distributed along the low, middle and high basin, by monthly sampling conducted from July till December 2005. The total and fecal coliforms in the water where determined by the Most Probable Number (MPN) method, using the Multiple Tube Fermentation technique. The Enterobacteriaceae were isolated and identified in samples of water from different stations at Cataniapo river. The lowest density of total and fecal coliforms were evident during the rainy season (July to September) and the highest during the drought period (October to December). The quantity of total coliforms differed significantly between the different stations at the Cataniapo river and amongst the different months sampled, while for fecal coliforms we found only significant differences only between the stations. We also found that the points 1 and 3 of the lower basin, had the highest densities for fecal coliforms, exceeding the stablished limit for human contact (total or partial). The Escherichia coli species was identified as the most frequent amongst all stations.

Utilização da vacina Escherichia coli J5 na imunização de novilhas leiteiras contra mastites causadas por E. coli / Use of an Escherichia coli J5 vaccine on immunization of dairy heifers against mastitis caused by E. coli

Avaliou-se a eficácia da vacina E.coli J5 na prevenção e no controle de mastites causadas por E.coli por meio da análise da prevalência de infecções intramamárias após o parto, ocorrência e intensidade de casos clínicos de mastite nos primeiros 100 dias de lactação, influência na contagem de células somáticas (CCS) e produção de leite. As novilhas, n=131, foram distribuídas em três grupos de animais - vacinados três vezes, vacinados duas vezes e não vacinados. As imunizações ocorreram 60 dias antes do parto, 30 dias antes do parto e na primeira semana pós-parto, esta última só para o grupo de três vacinações. Foram coletadas amostras de leite para diagnóstico microbiológico e avaliação da CCS, e registrados os dados relacionados à ocorrência e à intensidade dos casos clínicos e à produção de leite nos primeiros 100 dias de lactação. Não houve redução na prevalência de E.coli no pós-parto de novilhas vacinadas, e houve redução na ocorrência de casos clínicos por E.coli em novilhas vacinadas. Não foram observadas diferenças entre grupos com relação à CCS. Novilhas vacinadas com as três doses apresentaram maior produção de leite. A vacinação com E.coli J5 foi eficaz em reduzir a ocorrência de casos clínicos nos primeiros 100 dias da lactação, mas não interferiu na prevalência de infecções intramamárias após o parto, na intensidade de casos clínicos e na CCS.

Immunization of dairy heifers with E.coli J5 vaccine in order to prevent and control mastitis caused by E.coli was evaluated. Prevalence of postpartum intramammary infections by this agent; clinical mastitis occurrence and severity in the first 100 days of lactation, and its influence on somatic cell counts (SCC) and milk yield were analyzed. Heifers (n=131) were randomly assigned into three groups of vaccinated and unvaccinated animals. Immunizations occurred at 60 days prepartum, 30 days prepartum and in the first week after calving. Milk samples were collected for microbiological diagnosis and SCC evaluation, and data related to clinical mastitis occurrence; its severity and milk yield were recorded. No reduction in prevalence of postpartum intramammary infections caused by E.coli was observed in vaccinated heifers. Vaccinated heifers had less clinical mastitis than the unvaccinated group. Milk SCC did not differ between the experimental groups. Milk yield was higher in vaccinated animals. Immunization with the E.coli J5 vaccine was effective in reducing the occurrence of clinical mastitis and increase in milk yield in the first 100 days of lactation but did not affect SCC, prevalence of intramammary infections and severity of clinical mastitis after calving.

Enterobacteriaceae in processed cocoa products

Little is known of the presence of Salmonella in Brazilian cocoa, which justifies the present work that had the aim of checking the presence of total Enterobacteriaceae, coliforms, Escherichia coli and Salmonella in semi-processed cocoa products. A total of 150 samples of cocoa products from two different cocoa-processing manufacturers were analyzed (30 samples of nibs, 30 of liquor, 30 of cocoa cake, 30 of cocoa butter and 30 of cocoa powder). The samples of processed cocoa products had pH values between 5.31 and 7.35, and water activity ranging from 0.29 to 0.52. E. coli and Salmonella were not detected in any of the samples analyzed. Regarding the other analyzed microorganisms, 17 of the nibs contained total Enterobacteriaceae, 20 showed total coliforms, while thermotolerant coliforms were detected in one sample (0.6 log MPN/g). Seven percent of liquor and cocoa powder samples showed total coliforms. In cocoa cake, the same percentage in regard to total Enterobacteriaceae was observed. Total Enterobacteriaceae and total coliforms were detected in one sample of cocoa butter. Despite the low contamination observed, these results indicate failure in quality programs of the manufactures studied, since these bacteria are easily inactivated by thermal and sanitizer process.

Avaliação microbiológica da água consumida nos bebedouros da Universidade Estadual do Centro-Oeste, Guarapuava, Paraná, Brasil / Microbiological evalution of water from drinking-fountains of State University of Guarapuava, Paraná State, Brazil

A água é o principal elemento para os seres vivos, podendo ser também uma potencial via de transmissão de inúmeras doenças. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade Microbiológica da água destinada ao consumo humano de bebedouros da Universidade Estadual do Centro-Oeste (UNICENTRO). Foram colhidas 47 amostras de água de bebedouros localizados nos diversos departamentos da universidade. Utilizou-se o método de fermentação em tubos múltiplos que determina o Número Mais Provável (NMP) de bactérias coliformes totais e fecais/100 mL. Os resultados revelam 4/47 (8,5) amostras positivas para coliformes, totais e 1/47 (2) para coliformes fecais. Considerando a legislação vigente conclui-se que em três bebedouros a água, sob o ponto de vista bacteriológico, estava imprópria para o consumo humano

The goal of this work was to evaluate micriobiologic quality of water consumed in drinking-fountainsfrom State University of Guarapuava, Paraná state, Brazil. Total and fecal coliforms were searched for thepourpose of evaluating quality of water consumed. Fourty seven samples were obtainied and 4/47(8,5%) were positive to total coliforms and 1/47 (2%) were positive to fecal coliforms. Three samplesshowed unsatisfactory hygienic conditions considering Public Health Legislation